D-Luciferin,potassilum D-熒光素鉀鹽 分子生物試劑
簡(jiǎn)要描述:D-Luciferin,potassilum D-熒光素鉀鹽D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖)。
產(chǎn)品型號(hào): 1G
所屬分類:其他
更新時(shí)間:2024-08-18
廠商性質(zhì):代理商
D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽產(chǎn)品描述
D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,導(dǎo)入研究動(dòng)物如大小鼠體內(nèi),之后注入熒光素,通過生物發(fā)光成像技術(shù)(BLI)來檢測(cè)光強(qiáng)度變化,從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征。
D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽
D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報(bào)告基因分析;高通量測(cè)序和各種污染檢測(cè)。目前市場(chǎng)上有三種產(chǎn)品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光素鈉鹽,以及D-熒光素鉀鹽。這三種產(chǎn)品主要的差別在于溶解特性上。D-熒光素(游離酸)水溶性以及緩沖體系的溶解性都很弱,除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。但鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。配成液體后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實(shí)質(zhì)性的差別。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名(Chinese synonym)
D-熒光素鉀鹽;
英文別名(English synonym)
(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt;
CAS號(hào)(CAS NO.)
115144-35-9
分子式(Formula)
C11H7N2O3S2 K
分子量(Molecular weight)
318.42 g/mol
外觀(Appearance)
淡黃色粉末
溶解性(Solubility)
溶于水(60 mg/ml)
純度(Purity)(HPLC)
>99%
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃干燥避光保存。
使用方法
1.體外生物發(fā)光檢測(cè)
1)用蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成100 mM的儲(chǔ)存液(200×,濃度30mg/ml)。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復(fù)凍融。
2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1:200稀釋儲(chǔ)存液,配制工作液(終濃度150µg/ml)。
3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留。
4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析(或者細(xì)胞放在37℃短時(shí)間孵育后檢測(cè)可增強(qiáng)信號(hào))。
2. 活體成像分析
1)用無菌的DPBS(w/o Mg2+)配制D-熒光素鉀鹽工作液(15mg/ml),0.2µm濾膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復(fù)凍融。一旦使用,放到4℃解凍,保持冰冷且避光。
2) 注射量取決于注射方式,具體如下:
注射方式
劑量
靜脈注射(25-27gauge針頭)
按10µl/g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液
腹腔注射(25-27gauge針頭)
按10µl /g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液
肌肉注射(27gauge針頭)
50µl,濃度為1-2mg/ml熒光素工作液
鼻內(nèi)注射(pipette)
50µl,濃度為3mg/ml熒光素工作液
3) 注射入體內(nèi)10-20 min(待光信號(hào)達(dá)到zui強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期),再進(jìn)行成像分析。
注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定zui高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。